بررسی ساختار ایمونوژنیسیته پروتئین نو ترکیب hiv به دست آمده از ویروس gp۴۱-p۲۴

سابقه و هدف: پروتئینهای نوترکیب به دست آمده از ویروس hiv می توانند به عنوان یک ایمونوژن و تحریک کننده سیستم ایمنی باشند. از مهمترین آنها می توان به پروتئینهای داخلی (gag) و سطحی ویروس (env) اشاره کرد. در این تحقیق به بررسی ساختار ایمونوژنیسیته پروتئین نوترکیب gp41-p24 به دست آمده از ویروس hiv می پردازیم.روش بررسی: در مطالعه تجربی حاضر، پروتئین نوترکیب gp41-p24 که قبلا توسط روشهای کلونینگ تهیه گردیده و به حالت unfold نگهداری می شد با روشهای رقیق سازی پروتئین از حالتunfold به حالت refold در آمد. وزن مولکولی و غلظت پروتئینها با روشهای الکتروفورز و اسپکتروفتومتری اندازه گیری شد. refoldingپروتئین با استفاده ازالکتروفرز با ژل native و دستگاه circular dichroism) cd) بر اساس تغیرات ساختار دوم پروتئین ارزیابی شد. فعالیت ایمنی و ساختار ایمونوژنیسیته این دو پروتئین با استفاده از تست الایزا و وسترن بلات بر اساس نوع پروتئین و میزان جذب نوری (od) ثبت شد.یافته ها: نتایج نشان داد که وزن مولکولی این دو پروتئین 32 کیلودالتون می باشد و از خلوص کامل برخوردارند.refolding پروتئین از طریق ژل native مشاهده شد. در این پروتئین افزایش ساختارهای helix و beta و کاهش ساختار random (درمقایسه با پروتئین unfold) پدیدارگردید. همچنین واکنش ایمنی در پروتئین استاندارد وrefold شده با آنتی بادهای موجود در سرم بیماران کنترل مثبت hivمشاهده گردید و با استفاده از آنالیز واریانس یکطرفه اختلاف معنی داری بر حسب نوع پروتئین مشاهده نشد.نتیجه گیری: تحقیقات نشان داد که پروتئین نوترکیب gp41-p24 به دست آمده ازویروس hiv بعد از refolding دارای فعالیت ایمونوژنی می باشد و از آن می توان به عنوان یک ایمونوژن در ایمونیزاسیون و تحریک سیستم ایمنی استفاده کرد.